禽传染性支气*炎病毒检测试剂盒

　　一、禽传染性支气*炎病毒检测试剂盒

　　二、通用名称：禽传染性国际贸易病毒检测试剂盒（实时荧光PCR法）

　　三、包装规格 50T/盒

　　四、预期用途：

　　适用于禽国际贸易病毒检测，可用于临床禽国际贸易病毒感染的辅助诊断，但不作确诊使用。

　　五、禽传染性国际贸易病毒检测试剂盒原理：

　　针对禽国际贸易病毒基因组高度保守区域设计特异性引物和探针，在反应体系中含禽国际贸易基因组模板的情况下，PCR反应得以进行并释放荧光信号。利用荧光定量PCR仪对PCR过程中相应通道信号进行实时监测和输出，实现检测结果的定性分析。

　　检验方法

　　1. 试剂准备（试剂准备区）

　　（1）从冰箱中取出试剂盒, 从试剂盒中取出实验所需试剂,充分融化混匀并瞬时离心以去除管壁附着液体。

　　（2）核算当次实验所需要的反应数（n），并根据如下表所示反应体系计算当次实验所需要的各种试剂量。

　　n =阴性对照数（1T）+阳性对照数（1T）+误差预留量（1T）+样本数

　　单反液配制表(每份)

　　RT-PCR反应液

　　15.0 μL

　　逆转录酶

　　2.0 μL

　　Taq酶

　　3.0 μL

　　(3)在无菌离心管中加入上述试剂，充分混匀后瞬时离心。按照20 μL/管分装量将试剂分装至PCR反应管。

　　2.样本准备（样本处理区）

　　用QIAGEN、Roche公司RNA提取试剂盒提取RNA，具体操作按照其试剂盒说明书操作。

　　3.加样

　　在上述制备好的PCR反应样本管中分别加入处理好的待测标本RNA各5 μl、终体积25 μl/管，盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心，转移到PCR仪器上。阴性对照和阳性对照管则各加5 μL试剂盒自带的阴性对照或阳性对照品，终体积为25 μl/管，盖好PCR反应盖混匀后瞬时低速离心，转移到PCR仪器上。

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