酶联免疫吸附实验作为一种广泛应用于生物医学领域的强大工具,通过抗原与抗体的特异性结合和酶作为标记来检测目标分子。它在生物医学研究和临床诊断中发挥着重要作用,具有高度灵敏性、特异性和可量化结果的优势。
它的原理:
酶联免疫吸附实验是基于抗原与抗体的高度特异性结合原理,通过酶作为标记来检测抗原-抗体反应。其主要步骤包括:
1、固相吸附:将抗原溶液加入微孔板中,使其吸附于孔底或壁上;
2、阻断:加入阻断剂,防止非特异性结合;
3、抗体结合:加入待测样品,其中的抗体与吸附在固相上的抗原发生特异性结合;
4、酶标记二抗结合:加入被标记的二抗,该二抗会与待测样品中的抗体结合;
5、底物添加:加入底物,使酶标记的二抗发生可检测的酶催化反应;
6、反应终止:加入反应终止剂,停止酶催化反应;
7、读数:使用光度计测量反应产物的吸光度,根据吸光度值推断样品中的待测物质含量。
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